La electroporación, o el electropermeabilization, es un aumento significativo en la conductividad eléctrica y la permeabilidad de la membrana de plasma de la célula causada por un campo eléctrico externamente aplicado. Se utiliza generalmente en la biología molecular como manera de introducir alguna sustancia en una célula, tal como cargamento él con una punta de prueba molecular, una droga que puedan cambiar la función de la célula, o un pedazo de la DNA de la codificación.

Se forman los poros cuando el voltaje a través de una membrana de plasma excede su fuerza dieléctrica . Si la fuerza del campo eléctrico aplicado y/o la duración de la exposición a él se eligen correctamente, los poros formados por el pulso eléctrico resellan después de un corto período de tiempo, durante el cual los compuestos extracelulares tienen una ocasión de entrar en la célula. Sin embargo, la exposición excesiva de células vivas a los campos eléctricos puede causar el Apoptosis del y/o la necrosis - los procesos que dan lugar a muerte celular.

En biología molecular, el proceso de la electroporación es de uso frecuente para la transformación de las bacterias, de la levadura, y de los protoplastos de la planta además de las membranas del lípido, las bacterias también tienen membranas celulares que sean diferentes de las membranas del lípido y se hagan Peptidoglycan y de sus derivados. Sin embargo, las paredes son naturalmente porosas y actúan solamente como cáscaras tiesas que protejan bacterias contra consecuencias para el medio ambiente severas. Si las bacterias y los plásmidos se mezclan juntos, los plásmidos se pueden transferir en la célula después de la electroporación. Varios cientos de voltios a través de una distancia de varios milímetros se utilizan típicamente en este proceso. Luego, las células tienen que ser manejadas cuidadosamente hasta que hayan tenido una ocasión de dividir producir las nuevas células que contienen plásmidos reproducidos. Este proceso es aproximadamente diez veces más eficaces que la transformación química del .

Este procedimiento es también muy eficiente para la introducción de los genes extranjeros en las células de cultura del tejido, especialmente células mamíferas . Por ejemplo, se utiliza en curso de producir los ratones del golpe de gracia, así como en el tratamiento del tumor, la terapia de gene, y la terapia cell-based. El proceso de introducir DNAs extranjero en las células eucarióticas se conoce como transfección .

El proceso

La electroporación se hace con los electroporators, las aplicaciones del que crean la corriente eléctrica y la envían a través de la solución de la célula (típicamente las bacterias, solamente de otros tipos de la célula se utilizan a veces, según lo discutido arriba). La solución es medido con una pipeta en una cubeta de cristal o plástica que tenga dos electrodos de aluminio en sus lados.

Por ejemplo, para la electroporación bacteriana, una suspensión de alrededor 50 microlitros se utiliza generalmente. Antes de la electroporación se mezcla con el plásmido que se transformará. La mezcla se mide con una pipeta en la cubeta, el voltaje se fija en el electroporator (240 voltios es de uso frecuente) y la cubeta se inserta en el electroporator. Inmediatamente después que la electroporación 1 mililitro del medio líquido se agrega a las bacterias (en la cubeta o en un tubo de Eppendorf), y el tubo se incuba en la temperatura óptima de las bacterias por una hora o más y después se separa en una placa del agar .

El éxito del elecroporation depende grandemente de la pureza de la solución del plásmido, especialmente en su contenido de la sal . Las soluciones impuras pudieron causar una pequeña explosión (conocida como de formación de arcos, en este caso las bacterias son muertas y el proceso necesita ser hecho de nuevo. Si sucede esto a menudo, una precipitación adicional se puede realizar antes de la electroporación.

Usos médicos

Un voltaje más alto de la electroporación fue encontrado en cerdos irreversible para destruir las células de blanco dentro de una gama estrecha mientras que dejaba las células vecinas unnaffected, y representa así un nuevo tratamiento prometedor para el cáncer, la enfermedad cardíaca y otros estados de la enfermedad que requieren el retiro del tejido.
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